Qubit 4.0荧光定量技术是赛默飞世尔（Thermo Fisher Scientific）推出的一种高灵敏度、高特异性的核酸（DNA/RNA）或蛋白质定量方法，基于荧光染料与目标分子特异性结合的原理，通过检测荧光信号来精确计算浓度。以下是其核心特点和工作原理的详解：

一、赛默飞qubit4.0荧光计核心特点

1、高灵敏度：可检测低至0.05 ng/μL的DNA或RNA（比紫外分光光度法如NanoDrop灵敏1000倍）。

2、高特异性：荧光染料仅结合目标分子（如双链DNA、单链DNA或RNA），避免污染物（如盐、蛋白、游离核苷酸）干扰。

3、宽动态范围：无需稀释即可覆盖多个数量级（如DNA检测范围0.05–100 ng/μL）。

4、快速操作：仅需1–2 μL样本，2–3分钟完成检测。

5、自动化校准：内置标准曲线，仪器自动计算浓度。

二、赛默飞qubit4.0荧光计操作流程

1、配制工作液：将荧光染料与缓冲液按比例混合。

2、加样：将工作液与样本加入专用Qubit检测管。

3、孵育：室温静置2–5分钟（使染料充分结合）。

4、上机检测：将检测管放入Qubit 4.0，选择对应检测程序（如“dsDNA HS"）。

5、读取结果：仪器直接显示浓度（ng/μL）和样本总量（ng）。

三、赛默飞qubit4.0适用样本类型

1、核酸：双链DNA（dsDNA）、单链DNA（ssDNA）、RNA、microRNA。

2、蛋白：使用专用蛋白检测试剂盒（如Qubit Protein Assay Kit）。

3、兼容样本：纯化后的DNA/RNA（如来自试剂盒、凝胶回收产物）、细胞裂解液（需避免高浓度去垢剂干扰）。

四、注意事项

1、染料选择：根据样本类型选择对应试剂盒（如高灵敏度dsDNA HS或广范围dsDNA BR）。

2、避免污染：使用无核酸酶耗材，操作时戴手套。

3、样本要求：pH需中性（避免pH值影响染料结合）。

4、仪器校准：定期使用标准品校准（尤其更换试剂批次时）。