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PCR实验常见失败原因、及对策分析及体系优化

PCR虽然为一个简单的实验，但在实际过程中可能会出现各种问题。产生问题的原因可能来源于以下几个方面：实验操作，试剂质量，PCR反应过程中各种试剂的含量，以及反应条件，温度设置等，本文对各个方面进行了讨论，大家遇到问题后可以对号入座的查一下。当然，具体问题的解决还依靠实验者就可能的原因逐项排除，并不断的摸索才能*解决。假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①...

伯乐CFX96Touch实时荧光定量PCR仪和CCD成像有什么区别？

伯乐CFX96Touch实时荧光定量PCR仪比普通的PCR仪多了荧光信号采集系统和计算机分析处理系统，实时荧光定量PCR仪主要是用来定量分析和确定基因转录水平的，而普通的PCR仪是做定性分析和扩增基因片段，定量PCR仪可以做普通PCR仪的工作，而反之就不行了，况且这样代价太大了，一般的实验室都不允许这样做的。总之两者的功能不能互相取代。伯乐CFX96Touch实时荧光定量PCR仪因操作方便、运行速度快、实验结果准确，必然会从好设备变成分子生物学实验室的基础设备。荧光定量PCR...

热循环PCR仪如何选型？

购买一台新的PCR仪，这真是件幸福的事，毕竟以后大家就不用苦苦排队了。然而，这也不是个轻松的差事，市场上有那么多种仪器可以选择，光是比较参数，就够累了。况且PCR仪还是实验室中的老黄牛，几乎24小时运转，买台可靠的仪器尤为重要。一想到这儿，是不是更感觉压力山大。在签下订单前，也许你该考虑以下五个方面。终点、定量还是数字？如今的PCR仪器主要分为三大类：标准PCR（终点PCR）、实时定量PCR（qPCR）以及数字PCR（dPCR）。前两者大家都很熟悉，而后者是这两年冉冉升起的新...

PCR技术分享（原理、分类、步骤及主要试剂、设备准备）

聚合酶链式反应（PCR）原理DNA的半保留复制时，双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验条件下，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。PCR类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火(复性-延伸...

PCR热循环仪操作指南

一、开机连接电源线后，打开机器后部的主开关（在机器的左下角）。开机后机器进行自检“SelfTest”，自检结束后出现用户主界面，显示加热模块“Block”格式和温度“Temp”和热盖温度“Lid”，在屏幕左上角显示“Ready”。二、程序设置1.建立新程序按“File”→“New”→“Program”，进入一个编辑窗口输入程序名称按“Enter”键确认，之后进入程序编辑器；在“Header”中设置热盖的参数，输入温度和压力，温度默认值为96℃，一般设置为99℃，如变性温度较低...

离心机在哪些领域中可以使用

早在19世纪离心机就在工业生产中取得了应用。起先，离心机应用于牛奶分离、纺织品脱水和制糖厂结晶砂糖的脱水。目前，离心机已广泛应用于化工、石油、冶金和水处理等众多领域。离心机的传动方式经历了从手摇式到电动式、机械变速、油压气压为动力的机械变速直至当今的变频电机变速的过程。耐磨技术的不断取得突破，如硬质合金、陶瓷的广泛应用，也推动着离心机的应用领域快速拓展。3.1在聚合树脂领域在处理聚氯乙烯（PVC）过程中，离心机的处理能力大可达到15～18t/h（以干粉计），分离后的清液中固体...

双十一应节气活动价开始啦！奥林巴斯显微镜寻找专属的你

本公司针对双十一，现货优惠服务活动开始啦!!!双十一活动，拿出我们诚意，全新进口机器，让你用的满意，服务一直到底，您好在等什么呢？奥林巴斯显微镜常用型号优惠，打折打折在打折，欢迎尽情询价。以下型号超低优惠服务，只要入手，不会后悔!正置显微镜奥林巴斯CX23生物显微镜奥林巴斯CX33生物显微镜奥林巴斯CX43生物显微镜倒置显微镜奥林巴斯CKX53倒置显微镜体式显微镜奥林巴斯SZ61体式显微镜CX33相应参数：用途：可用于普通染色的切片观察，以及临床、科研常规显微检验工作。1．工...

为什么伯乐MicroPulser电穿孔仪1652100使用前要预热？

伯乐MicroPulser电穿孔仪1652100是功能强大的将核酸、蛋白质以及其它分子导入多种细胞的有效技术。通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。伯乐MicroPulser电穿孔仪1652100的这种技术可以将核苷酸、DNA与RNA、蛋白、糖类、染料以及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对于其它物理和化学转化方法，是一种有价值和有效的替代方法。广泛用于植物、动物和微生物的各类细胞电穿孔。方波和指数波型确保所有细胞类型（原核及真核）...

奥林巴斯CX23生物显微镜的目镜怎么放置？

奥林巴斯CX23生物显微镜可分为光学放大及电子放大两大类。前者按用途可分为普通型、特种型、型显微镜和手术显微镜。普通型生物显微镜仅供一般用途使用，通常的农用与医用显微镜、倒置显微镜均属这一类。奥林巴斯CX23生物显微镜由物镜和目镜两部分组成。因为被观测的物体本身不发光，而借助于外界照明，故显微镜需要有一个照明系统，这些部分都是由较复杂的透镜组成，尤其物镜更为复杂。特种型生物显微镜可作某些专用的观察和研究。暗场生物显微镜、荧光显微镜、偏光显微镜、相衬和干涉相衬显微镜等均属于这一...

实验室中的小能手，艾本德移液器专属

EppendorfResearchplus手动移液器可实现轻松移液的超轻移液器，融合超过60年的液体处理经验，是实科研实验常用的移液器之一。艾本德采用开创性的EppendorfPhysioCareConcept®，Researchplus移液器具备出色的人体工程学性能，同时可在实验室保护您的身体健康。艾本德移液器具备非常低的重量和操作力度，可高压灭菌，并且易于使用。艾本德也针对科研的需求提供多种产品型号，包括固定或可调量程单道移液器，8道、12道、16道或24道的多道...